产品信息

产品概述
Piko Orange Protein Quantitation Kit 是一个高度敏感的基于荧光技术定量纯化蛋白质的试剂盒,其检测蛋白浓度范围为 0.1 ~10µg/mL。比起传统定量方法如BCA、Bradford或Lowry蛋白定量分析,Piko Orange蛋白定量试剂盒敏感性更佳,此外,与Nano Orange蛋白质定量测定技术相比具有更加优秀的线性和重现性。Piko Orange蛋白定量试剂盒可显示不同蛋白质之间的最小变异性,且荧光信号稳定长达16 h;其受测样本不论为纯化蛋白或抗体皆适用。需特别注意的是,Piko Orange对盐类、缓冲液、去垢剂或是其他化学物质都有不同程度的耐受性(表1)。
储存条件
常温运输。组分A常温保存;组分B常温避光保存;组分C于4℃保存。有效期三年。
注意事项
本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
使用方法
1. 制备1×Piko Orange缓冲液:1:10 稀释10×缓冲液在 dH2O。例如,添加1 mL 10×缓冲液至9 mL dH2O 。Piko Orange缓冲液可以储存在室温下。
2. 使用前准备Piko Orange工作液:将200×PikoOrange染料按1:200用1×Piko Orange缓冲液稀释。例如,添加25 µL 500×Piko Orange染料至5 mL 1×PikoOrange缓冲液。
【注】:您将需要大约3 mL工作液制作标准曲线(见表2)以及每孔检测样品250 µL工作液。
3. 准备未知样本:10 µL样本添加250 µL Piko Orange工作液。
【注】:您可能需要稀释未知样本以得到不同浓度的样本。样品稀释可能会减少干扰物质的影响。
4. 准备一个蛋白质标准曲线所需的BSA浓度,如表2所示。
5. 样本和标准蛋白加热至90 ~ 95℃孵育10 min,此过程需避光操作。
6. 取出样本室温避光放置20 min冷却。短时间离心收集全部样本。
7. 每个标准样品或未知样品取200 µL转移到96孔酶标板,荧光酶标仪读数。激发/发射波长为480/598 nm 。
【注】:样品可以被转移到荧光试管使用荧光仪测量。如果需要超过200 µL体积测量,等比例放大配置方案。
附:PikoOrange 的兼容性

表 2 BSA 标准品体系配制方法


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