- 产品参数
- 产品货号： DW002
- 产品规格： 5 mL / 100 mg / 1 g
- 品牌： belongbio
产品信息
产品概述
Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低，在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光。Hoechst系列染料因与DNA结合的特性，也常被用来进行线粒体 DNA的观察。Hoechst33258和Hoechst33342是两种非常相近的Hoechst染料，他们都在紫外段350 nm被激发，发射波长都为461 nm，两种染料经常被用来替代另一种荧光染料DAPI。Hoechst 33342比33258具有更强的亲脂性，因此能更好的透过完整的细胞膜，在部分实验中Hoechst 33258的细胞透过性存在明显不足。用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33342工作终浓度为0.5 ~ 5 μM，在一些敏感性实验时，最好设置多个染色浓度，以获得最佳染色效果。
储存条件
干冰运输，-20℃干燥避光保存。有效期一年。
产品参数
注意事项
1. 为了您的健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。本产品仅作科研用途。
2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
3. Hoechst33342溶于水，溶解度可达20 mM（约 10 mg/mL）。
4. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
使用方法
（一）缓冲液制备
用PBS或合适的缓冲液制备10 ~ 50 μM Hoechst33342染色液。
（二）固定的细胞或组织染色
对于固定的细胞或组织样品，固定后适当洗涤去除固定剂。依次按步骤进行免疫荧光染色，和Hoechst33342染色。如果不进行免疫荧光染色，则直接按步骤进行Hoechst33342染色。
1. 对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst33342染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3 ~ 5 min。
2. 吸除Hoechst33342染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2 ~ 3次，每次3 ~ 5 min。
3. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm，发射波长461 nm。
（三）活细胞或组织染色
1. 细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1 mL染色液，对于96孔板一个孔需加入100 μL染色液。
2. 在37℃培养细胞10 ~ 20 min。
3. 用PBS或合适的缓冲液洗细胞2次。
4. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm，发射波长461 nm。
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