- 产品参数
- 产品货号： BLS013
- 产品规格： 3 mL / 6 mL / 50 mL / 100 mL
- 品牌： belongbio
产品信息
产品概述
本试剂盒基于免疫组织化学检测原理，切片经抗原热修复后与一抗试剂进行孵育，在原位形成一抗与目标抗原的抗原-抗体复合物；抗原-抗体复合物中一抗分子再与辣根过氧化物酶（HRP）标记的聚合物二抗通过孵育结合，在原位进一步形成抗原-抗体-二抗聚合物的复合物；最后通过HRP催化二氨基联苯胺（DAB）在抗原部位形成棕色沉积物。本试剂盒可应用于免疫组化及原位杂交实验。
储存条件
4℃保存，≤0℃运输。有效期一年。
注意事项
为了您的健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。本产品仅作科研用途。
实验流程
1. 样品准备:常规处理石蜡或冰冻组织切片或细胞爬片等待检测样品，至水化步骤。
2. 阻断内源性过氧化物酶：切片充分甩干后加内源性过氧化物酶阻断剂50 ~ 100 µL，湿盒中室温孵育30 min；或者浸泡在内源性过氧化物酶阻断剂中15 ~ 30 min。PBST浸洗 3 min，重复1 ~ 2次。
3. 孵育一抗：在切片上滴加用抗体稀释液稀释好的的鼠/兔源一抗，切片平放于避光湿盒内，4℃孵育过夜或者37℃孵育1 ~ 2 h（湿盒内加少量水防止抗体蒸发）。
4. 孵育多聚HRP二抗：玻片置于PBST（pH7.4）中，在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5 min。切片稍甩干后滴加Polymer-HRP 羊抗鼠/兔二抗试剂50 ~ 100 µL（约1滴）覆盖组织，避光室温孵育30 min。PBST 浸洗5 min，重复3 ~ 5次。
5. DAB显色：切片甩干后滴加新鲜配置的DAB显色工作液（具体步骤请参考DAB显色试剂盒操作说明）。
6. 复染、脱水、透明、封片、镜检。
结果判读
在阴阳性对照和空白对照显色正常的前提下：
阳性：组织切片中预期细胞阳性部位显棕色，无背景染色。
阴性：组织切片中预期细胞阳性部位无棕色染色。
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