产品信息

产品概述
Trans RNAi 细胞转染试剂是一款基于脂质体技术开发的转染试剂,能够高效地包裹小RNA分子(如siRNA,miRNA和ASO等),并高效地导入多种类型的细胞,包括贴壁细胞,悬浮细胞以及难以转染的细胞,如Jurkat细胞系,原代人T细胞等;转染效率高且稳定,在完全培养基(含血清和双抗)中高效转染不受影响;安全性好毒性低,转染后无需换液;广泛应用于基因功能、小RNA治疗等研究领域。
储存条件
2 ~ 8℃保存。有效期一年。
注意事项
1. 为了您的健康,请穿实验服并佩戴口罩和一次性手套操作。本产品仅作科研用途。
2. 小RNA母液准备:RNA使用无核酸酶纯水稀释至浓度大于等于16 μmol/L备用。
3. 培养基中的血清及双抗对本转染试剂无影响,采用本试剂盒进行转染实验无需更换基础培养基,使用完全培养基即可。本转染试剂转染效率高,毒性低,细胞转染后无需换液,正常培养即可。
4. 小RNA推荐用量不一定适配全部的小RNA,可以在推荐用量的0.5到4倍的范围内进行优化测试。
实验方案——DNA转染
(一)细胞培养
1. 贴壁细胞:转染前一天在细胞培养器皿中接种细胞,使得转染时的细胞汇合度达到65% ~ 80%。
2. 悬浮细胞:当天制备转染复合物前,接种后可以直接进行转染实验。
注:为获得良好的转染效率,转染所使用的细胞需要有良好的活性及生长状态;部分细胞在转染前进行必要的预处理(比如原代T细胞转染前需要激活等)。
(二)细胞转染
(以24孔板为例)
1. 小RNA Mix配制:使用2×Buffer和纯水将小RNA稀释并混匀,使最终小RNA Mix中小RNA浓度为8 μmol/L,Buffer浓度为1×。
2. 转染复合物配制:取无菌离心管,向管底加入相应体积的Trans RNAi 细胞转染试剂,再加入相应体积的小RNA Mix,使用移液器快速吹吸混匀30次左右,禁止涡旋;室温静置孵育5 min。
注:①在配制转染复合物时建议多配制1 ~ 2孔的数量,以免因移液损失导致转染复合物不够用;②转染复合物制备完成后,请在半小时以内加入细胞中。
3. 转染:将转染复合物按相应体积,加入细胞中并混匀,转染结束后将细胞正常培养,无需换液,并按照实验需求进行分析检测。
注:转染复合物加入细胞之后,可以摇匀,或者使用移液器吹吸混匀。
表1.不同培养板所需转染试剂和小RNA用量参考


复制产品链接
长按图片保存/分享