- 产品参数
- 产品货号： PY004
- 产品规格： 20rxns
- 品牌： belongbio
产品信息
产品概述
外泌体（Extracellular Vesicles，EVs）是一类由细胞释放到细胞外的小囊泡，其直径通常在30 ~ 1000 nm，携带多种生物活性分子，如蛋白质、核酸、脂质和细胞因子等。外泌体可以携带特定的信号分子介导细胞间通讯，调节受体细胞的生理和病理状态，参与多种疾病的发生和发展。本试剂盒提取的外泌体可用于蛋白分析、核酸分析、电镜分析、细胞共培养等实验。
储存条件
常温保存。常温运输，有效期两年。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 若待处理样品粘度过高，可使用4℃预冷的1×PBS缓冲液稀释。
4. 若提取获得的外泌体粘度过高，可在使用外泌体纯化滤器前，使用4℃预冷的1×PBS缓冲液稀释。
5. 实验前请保证细胞死亡率不高于5%，避免活细胞产生的外泌体被污染，影响实验结果。
实验流程
（一）样品预处理
1. 对于细胞上清，单次提取时的样品量最低为20 mL。若为新鲜样品，请收集样品后置于冰上。若为冻存样品，从冰箱取出后置于25℃水浴中进行解冻，完全融化后置于冰上。
2. 将样品转移至离心管中，4℃，3000×g离心10 min。将上清液转移至新的离心管中。
（二）提取外泌体
1. 向去除沉淀的上清液中加入外泌体浓缩试剂。外泌体浓缩试剂与上清液的体积比为1：4。
2. 将样品振荡混匀，4℃静置孵育2 h。
3. 将样品于4℃，10000×g离心60 min。
4. 弃去上清后，取100 μL 1×PBS将沉淀吹打混匀。将混匀的重悬液转移至新的1.5 mL EP管中。
5. 将重悬液4℃，12000×g离心2 min，弃去沉淀。
（三）纯化外泌体
1. 将上一步收集的上清液转移到外泌体纯化滤器中，4℃，3000×g离心10 min。收集管中的液体即为纯化的外泌体颗粒。
2. 纯化的外泌体可以置于-80℃保存。
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