产品概述
Trans RNA细胞转染试剂是一款新型、性能稳定的siRNA专用转染试剂,它具有较强的压缩RNA的能力,能够把RNA高效率、迅速地转染到真核细胞之中,而不被核酸酶降解。与其他转染试剂相比,具有毒性低、稳定性好、耐血清能力强、转染简单易行、重复性好等优点。Trans RNA细胞转染试剂可适用于众多原代培养和转化细胞株的siRNA转染。沉默效率高且性能稳定,在有无血清存在的细胞培养基中均能获得非常理想的基因沉默效果。
储存条件
2 ~ 8℃保存,常温运输。有效期一年。
注意事项
为了您的健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。本产品仅作科研用途。
实验方案
siRNA的转染:以24孔板为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:
1. 细胞接种:每孔接种0.5 ~ 1.0×105个细胞,细胞培养12 ~ 24小时,使转染时细胞密度达到60 ~ 70%融合度。
2. siRNA稀释:将15 pmol的siRNA加入Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10 μL。
3. 转染试剂稀释:取1 μL的Trans RNA细胞转染试剂加入到9 μL的Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10 μL。
4. 复合物制备:将上述siRNA稀释液和转染试剂稀释液混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟。
5. 将上述20 μL复合物加入到24孔板中,轻轻吹打混匀,继续培养18 ~ 48小时后检测转染效率,无需更换培养基。

表1.不同培养板所需转染试剂siRNA的用量
siRNA转染的优化
可通过改变细胞密度、siRNA浓度以及Trans RNA细胞转染试剂浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,Trans RNA(μL):siRNA(pmol)可以在0.02:1和0.15:1之间调整。

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