产品概述
Trans难转DNA细胞转染试剂是一款适用于难转细胞的DNA专用转染试剂,可用于质粒DNA的高效传送。它具有极强的DNA转染能力,与其它转染试剂相比,具有转染效率高、不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。Trans难转DNA细胞转染试剂可适用于众多难转染细胞株的DNA转染、瞬时转染及稳定转染。适用于多种贴壁细胞系,特别适用于各种难转细胞如BMDC、4T1、CT26、DC2.4等难转染细胞,均可得到较高的转染效率,且重复性好。
储存条件
2 ~ 8℃保存,常温运输。有效期一年。
注意事项
为了您的健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。本产品仅作科研用途。
实验方案
质粒DNA的转染:以24孔板为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:
1. 细胞接种:每孔接种0.5 ~ 1.0×105个细胞,细胞培养12 ~ 24小时,使转染时细胞密度达到60 ~ 70%融合度。
2. DNA稀释:将质粒DNA稀释于Opti-MEM培养基中,终浓度0.1mg/mL。
3. 复合物制备:取2μL的Trans难转DNA细胞转染试剂原液加入到8μL Opti-MEM培养基中,取4 μL浓度为0.1mg/mL的质粒DNA加入6μL Opti-MEM培养基中,两者等体积混合。
4. 室温静置10分钟。
5. 每孔20μL复合物加入细胞培养板中,混匀,37℃培养18 ~ 48小时后检测基因表达,无需更换培养基。

表1.不同培养板所需转染试剂和DNA的用量
质粒DNA和siRNA的转染优化
可通过改变细胞密度、DNA浓度以及Trans难转DNA细胞转染试剂浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,Trans难转DNA细胞转染试剂(μL):DNA(μg)可以在2:1和5:1之间调整。

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