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Smart Cell 神经酰胺高尔基体染色试剂盒(Green)(RS021)

  • 产品货号: RS021
  • 产品规格: 1 vial / 1 bottle(25 mL) / 1 vial(200 µL)/ 1 vial(50 µL)
  • 品牌: belongbio
  • 产品参数
  • 产品货号: RS021
  • 产品规格: 1 vial / 1 bottle(25 mL) / 1 vial(200 µL)/ 1 vial(50 µL)
  • 品牌: belongbio

产品信息

产品概述

高尔基体是大多数真核细胞胞质内囊泡和折叠膜的复合体,参与分泌和细胞内运输。它修饰内质网(ER)中内置的蛋白质和脂质,并准备将其输出到细胞外。它还在脂质在整个细胞中的运输和溶酶体的形成中起着重要作用。Smart Cell NBD神经酰胺高尔基染色试剂盒提供了一种简便,快速的方法,可以选择性地对活细胞或醛固定细胞中的高尔基染色。将C6 NBD神经酰胺与牛血清白蛋白(C6-NBD-Ceramide-BSA)形成复合物给予细胞。高尔基体通过形成相应的荧光代谢产物而被染色。


储存条件 

≤0℃运输。-20℃避光保存,有效期一年。


使用方法 

(一)简要概述 

1. 根据需要处理细胞。 

2. 加入C6 NBD神经酰胺工作溶液,在室温或37℃下孵育15 ~ 30 min。 

3. 更换染色缓冲液,在室温或37℃下孵育15 ~ 30 min。 

4. 使用FITC滤镜套件在显微镜下观察。 

5. 可选:用4%甲醛固定细胞。 

(二)溶液配制 

1. 储备溶液配制 

 除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20℃,避免反复冻融循环。C6 NBD神经酰胺储备溶液(100×):将100 µL的DMSO(组分C)加入小瓶C6 NBD神经酰胺(组分A)中并充分混合。

【注】:未使用的C6 NBD神经酰胺原液在-20℃保存,避免冻融循环。 

2. 工作溶液配制 

C6 NBD神经酰胺工作溶液:将10 µL的NBD神经酰胺原液(100×)添加到990 µL的染色缓冲液(组分B)中,制成C6 NBD神经酰胺工作溶液。

可选:将10 µL的Hoechst 33342(组分D)添加到1 mL的NBD神经酰胺工作溶液中以进行核染色。 

(三)操作步骤 

1. 根据需要处理细胞。 

2. 直接在细胞培养基中加入100 µL的C6 NBD神经酰胺工作溶液。 

3. 在室温或37℃下孵育15 ~ 30 min。 

4. 除去C6 NBD神经酰胺工作溶液,并用100 µL /孔的染色缓冲液(组分B)代替。 

5. 在室温或37℃下孵育15 ~ 30 min。 

6. 在装有FITC滤光片的荧光显微镜下观察。 

7. 从步骤4中除去染色缓冲液,然后向每个孔中添加100 µL/孔/96 孔板的4%甲醛固定缓冲液(未提供)。

【注】:对于非贴壁细胞,请添加所需量(例:2×106 细胞/mL)的4%甲醛固定液。(可选) 

8. 在室温下将平板孵育20 ~ 30 min,去除固定剂。用PBS洗涤细胞2 ~ 3次,然后用100 µL/孔的染色缓冲液(组分B)替换。(可选) 


注意事项 

本产品仅限于科学试验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

Smart Cell 神经酰胺高尔基体染色试剂盒(Green)(RS021)
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