产品信息

注:Wash WS在使用前需添加60 mL(PU007-01)/120 mL(PU007-02)无水乙醇。
产品概述
本试剂盒是一种用于PCR产物纯化或从多种DNA反应体系中纯化DNA的试剂盒。本试剂盒中的硅基质离子交换柱可以有选择性地吸附核酸分子,去除其他杂质,从而获得高质量的DNA回收产物。所获得的DNA可以直接用于酶切、连接、测序等后续的分子生物学试验。
产品特点
1. 操作安全便捷,15 min即可完成DNA纯化操作。
2. 适用范围广,回收效率高。
储存条件
室温保存,有效期12个月。
自备试剂
小型高速离心机,乙醇。
注意事项
1. 废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃;
2. 第一次使用前,请在Wash Buffer中加入指定量无水乙醇,并在瓶上做好标记;
3. 为保证您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩进行操作。
使用方法
注意:第一次使用前,请在Buffer WS中加入指定量无水乙醇,并在瓶上做好标记。
1. 向样品中加入4 ~ 5倍体积的PU Buffer,充分混匀;
2. 将混合液转移至纯化柱中,12000 rpm离心1 min,倒弃收集管内液体,将吸附柱重新放回收集管中;
3. 向纯化柱中加入700 μL Wash Buffer,12000 rpm离心1 min,倒弃收集管内液体,将吸附柱重新放回收集管中;
4. 重复步骤3一次;
5. 将空纯化柱和收集管于12000 rpm离心2 min,纯化柱敞口于室温下放置2 min,使纯化柱中残留液体完全挥发;
6. 将纯化柱转移至新的洁净EP中,向吸附膜中央悬空滴加30 ~ 50 μL Elution Buffer(亦可用Nuclease-free Water替代),静置1 min,12000 rpm离心1 min。若想增加DNA的回收效率可重复一次洗脱步骤;
7. 弃去纯化柱,所得液体即为纯化产物,可直接用于下一步试验,或者-20℃储存。
常见问题
(一)DNA回收效率低
1. Wash Buffer中未加入正确量的无水乙醇;
2. 纯化片段小于100 bp或大于10 kb时,DNA的回收效率会降低。样品中DNA含量过低也会导致回收效率下降;
3. 洗脱液加入不当。洗脱液应悬空从纯化膜中央滴加,且添加量不少于30 μL,以确保能够完全覆盖纯化膜,从而达到最大洗脱效率;
4. 脱液提前进行65℃预热,有助于提高洗脱效率。
(二)回收产物用于后续酶切等实验使效率低
1. 混有RNA:RNase A消化不彻底,尝试减少菌量或加入Solution Ⅲ后延长放置时间。若Solution I放置时间较久,请重新加入RNase A;
2. 乙醇残留:空柱离心后纯化柱开盖晾干2 ~ 5min;
3. 盐分残留:请确保洗涤操作时充分洗去管壁上的盐分。


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