产品信息

产品概述
CCK-8试剂盒(Cell Counting Kit-8)是目前检测细胞增殖和毒性应用最广泛的方法之一,主要成分为WST-8,化学名为2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐。WST-8是一种与MTT类似的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原为水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan),颜色深浅与细胞增殖成正比、 与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450 nm波长处测定OD值,间接反映活细胞数量。本试剂盒可用于细胞增殖测定、细胞毒性检测、药物筛选等实验。
储存条件
-30 ~ -15℃保存。≤0℃运输,有效期一年。可4℃短期保存,有效期三个月。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 请避免反复冻融,会导致测定背景的OD值升高。
4. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,所以还原剂(例如一些抗氧化剂)会干扰检测,如果待检测体系中存在较多的还原剂,需设法去除。
5. 进行药物抑制实验时,如果药物中含有金属,如Pb2+、Fe2+、Cu2+等金属会对CCK-8 Solution的显色反应产生影响,从而导致检测的灵敏度降低。
使用方法
1. 以96孔板为例,每孔接种100 μL的细胞悬液(贴壁细胞至少1000个/孔,白细胞至少2500个/孔,具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小、细胞增殖速度的快慢等因素决定,建议实验前设定几个不同细胞数量的梯度孔进行条件测试),在细胞培养箱中预培养24 h。
2. 向每孔加入10 μL待测物质,在培养箱中孵育一段时间(根据待测药物而定)。若仅需测定细胞活性,可跳过该步骤。
3. 向每孔中加入10 μL CCK-8(注意不要产生气泡,轻轻混匀),在培养箱中孵育(一般为0.5 ~ 2 h)。
4. 使用酶标仪测定450 nm处的吸光值。

复制产品链接
长按图片保存/分享