- 产品参数
- 产品货号： PU003
- 产品规格： 50 rxns / 200 rxns
- 品牌： belongbio
产品信息
注：Wash Buffer在使用前需添加20 mL（PU003-01）、80 mL（PU003-02）无水乙醇。
产品描述
本试剂盒基于SPRI（Solid Phase Reverse Immobilization）原理，提供一种简单高效的PCR纯化方法。本试剂盒利用优化的缓冲液体系，使磁珠高效结合、释放DNA，并有效去除样本中的蛋白、盐离子、游离核苷酸等杂质，最终获得高质量的PCR纯化产物。本试剂盒适用于100 ~ 8000bp DNA片段，通常回收率可达90%以上。此外，对8 ~ 10 kbp的DNA片段也有较好的纯化效果。所得DNA可直接用于后续的PCR、酶切、连接、转化等实验，亦可用于低浓度样品的浓缩。
产品特点
1. 操作简捷，耗时短，仅需30 min即可获得高纯度PCR纯化产物。
2. 产品可常温保存，稳定性好。
储存条件
该产品可常温储存。
其他必需材料
无水乙醇、Nuclease-free离心管、磁力架。
操作示意图
图. 磁珠纯化PCR产物原理示意图
使用方法
注意：第一次使用前，请在Wash Buffer中加入指定量无水乙醇，并在瓶上做好标记；Bind MagBeads在使用前请务必振荡混匀；实际实验中根据样品体积，试剂用量可参照下表（样品体积小于50 µL时，建议补足至50 µL，以保证纯化效率）。
以50 µL PCR产物为例，具体操作步骤如下：
1. 将Bind MagBeads涡旋震荡或颠倒数次以充分混匀，向待纯化样本中加入等体积Bind MagBeads，用移液枪吹打至充分混匀后于室温孵育5 min；
2. 将样品置于磁力架上磁吸5 min，待磁珠完全聚集后，小心移除上清液（离心管仍置于磁力架上）；
3. 保持样品置于磁力架上，加入250 µL Wash Buffer漂洗磁珠（加入时不要扰动磁珠），室温孵育30 s，小心吸去上清；
4. 重复上一步操作，共漂洗两次，尽量吸净残留液体；
5. 保持样品置于磁力架上，室温下开盖干燥磁珠3 ~ 5 min，使残留的乙醇等液体完全挥发（磁珠表面无明显光泽即可）；
6. 将样品从磁力架取出，加入20 ~ 100µL Elution Buffer（亦可用Nuclease-free Water替代），用移液枪轻轻吹打混匀，室温孵育3 min。为提高洗脱效率，可使用65℃预热Elution Buffer进行洗脱；
7. 将样品置于磁力架上，待磁珠完全聚集后（约2 min左右），小心吸取上清至新的离心管中，该溶液即为纯化的PCR产物。纯化产物可直接进入下一步试验，或者-20℃储存。
参考用量
注意事项
1. 磁珠使用前必须混匀，否则会影响样品的回收率；
2. 由于磁力架的磁力差异，磁珠分离时间可能需要延长，具体以溶液彻底澄清为准；
3. 操作过程中要保证无核酸酶污染；
4. 磁珠开盖干燥时间不可过长，防止磁珠过分干燥龟裂，导致核酸洗脱回收率降低；
5. 在最后一步吸取上清时，建议使用磁力较强的磁力架，并留下1 ~ 2 µL液体，以避免磁珠被吸取。
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