- 产品参数
- 产品货号： PU005
- 产品规格： 50 rxns / 200 rxns
- 品牌： belongbio
产品信息
注：Wash WS在使用前需添加60 mL（PU005-01）/120 mL（PU005-02）无水乙醇。
产品描述
本试剂盒提供一种简单高效的从琼脂糖凝胶中回收DNA的方法。本试剂盒可以回收100 bp以上的DNA片段，通过磁珠高效结合、释放DNA，并有效去除样本中的蛋白、盐离子、游离核苷酸等杂质。回收纯化获得的DNA可直接用于酶切、连接、转化、PCR、dsRNA合成等后续操作。
产品特点
1. 溶胶速度快，操作便捷高效。
2. 磁珠性能稳定，可重复性好。
储存条件
室温保存，有效期12个月。
自备试剂
无水乙醇，异丙醇，磁力架（推荐MagiCute磁力架MC001）。
操作示意图
图. 磁珠进行DNA胶回收原理示意图
使用方法
注意：第一次使用前，请在Buffer WS中加入指定量无水乙醇，并在瓶上做好标记；MagBeads在使用前请务必振荡混匀。
1. 在长波紫外灯照射下将目的条带从琼脂糖凝胶中切下（尽量去除多余的琼脂糖凝胶），称重后将胶块放入干净的1.5 mL或2 mL EP管中；
2. 加入3倍体积Buffer GM（如胶块重量为100 mg，加入溶胶液300 μL）后，使用65℃水浴或金属浴孵育10 min，期间颠倒几次以加速胶块溶解；
3. 胶块完全溶解后，向管内加入100 μL异丙醇和25 μL MagBeads，吹打混匀，室温静置5 min；
4. 将EP管置于磁力架上吸附5 min，待磁珠完全聚集后，小心移除上清液（离心管仍置于磁力架上）；
5. 样品仍置于磁力架上，加入600 µL Buffer WS漂洗磁珠（加入时注意不要扰动磁珠），室温孵育30 s，小心吸去上清；
6. 重复上一步操作，共漂洗两次，尽量吸净残留液体；
7. 保持样品置于磁力架上，室温下开盖干燥磁珠1 ~ 3 min，使残留的乙醇等液体完全挥发（磁珠表面无明显光泽即可）；
8. 将样品从磁力架取出，加入50 µL Nuclease-free Water，用移液枪轻轻吹打混匀，室温孵育3 min。为提高洗脱效率，可使用65℃预热的Nuclease-free Water进行洗脱；
注意：洗脱液的用量一般随磁珠量的增加而相应增加，通常不少于磁珠体积用量的2倍。
9. 将样品置于磁力架上，待磁珠完全聚集后（约2 min左右），小心吸取上清至新的离心管中，该溶液即为回收纯化的DNA产物。纯化产物可直接进入下一步试验，或者-20℃储存。
注意事项
1. 磁珠使用前必须混匀，否则会影响样品的回收率；
2. 为避免溶剂长时间暴露于空气中发生挥发、pH值变化等，请在使用后及时盖紧盖子；
3. 溶胶液在低温下可能会有沉淀，请在使用前将其加热37℃溶解即可；
4. 溶胶液放置过久pH升高，或样品中碱性物质太多，会使回收率降低，可在溶胶液中加入加5 ~ 10μL 3M醋酸钠（pH5.2），将pH值调到5 ~ 7；
5. 回收纯化的DNA片段一般在100 bp至10 kb，片段过大或过小都不利于回收。若有需要，请在胶块溶解后添加适量异丙醇或选择适宜洗脱温度，以提高回收效率；
6. 为保证回收效率，电泳时请尽量避免电泳液过热，切胶时尽量减少紫外照射时间，以减少对DNA的损伤，并尽可能割除不含DNA的凝胶部分；
7. 为保证您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩进行操作。
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